Export iten: EndNote BibTex

Please use this identifier to cite or link to this item: http://tede.upf.br:8080/jspui/handle/tede/2251
Full metadata record
DC FieldValueLanguage
dc.creatorRoesler, Eduardo André-
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/8845940472503375por
dc.contributor.advisor1Deuner, Carolina Cardoso-
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/3029556593136573por
dc.date.accessioned2022-06-30T12:15:32Z-
dc.date.issued2021-04-05-
dc.identifier.citationROESLER, Eduardo André. Construções gênicas para o silenciamento gênico induzido pelo hospedeiro em arabidopsis e trigo para o controle de giberela. 2021. 96 f. Tese (Doutorado em Agronomia) - Universidade de Passo Fundo, Passo Fundo, RS, 2021 .por
dc.identifier.urihttp://tede.upf.br:8080/jspui/handle/tede/2251-
dc.description.resumoConstruções gênicas para o silenciamento gênico induzido pelo hospedeiro em arabidopsis e trigo para o controle de giberela. [154] f. Tese (Doutorado em Agronomia) – Universidade de Passo Fundo, Passo Fundo, 2021. A giberela causada pelo fungo ascomiceto Gibberella zeae (Schwein.) Petch, forma assexuada Fusarium graminearum Schwabe se destaca como importante doença do trigo, por reduzir a produtividade e qualidade dos grãos, além de causar contaminação por micotoxinas. As estratégias de controle disponíveis, tais como a resistência genética, os controles químicos e culturais são insuficientes para conter epidemias nos anos em que as condições ambientais são favoráveis à infecção. Considerando esses fatores, é necessário buscar novas estratégias para o controle desta doença. A tecnologia de Silenciamento Gênico Induzido pelo Hospedeiro (Host Induced Gene Silencing, HIGS), é baseada em RNA de interferência (RNAi) e, no caso de plantas, visa ao silenciamento de genes importantes para o crescimento, desenvolvimento ou patogenicidade dos patógenos. Esta estratégia pode ser utilizada no controle de fungos fitopatogênicos, e já foi demonstrado o aumento na resistência a F. graminearum em trigo e cevada. O objetivo geral foi verificar a capacidade de construções gênicas de RNAi para HIGS de genes alvo importantes para a patogenicidade ou virulência no controle de F. graminearum, e objetivos específicos: i) Avaliar o potencial das construções gênicas múltiplas RNAi-Chs3b, RNAi-Cyp51-Tri em arabidopsis e trigo e a construção gênica RNAi-Synchit2, com parte de gene quitina sintase de Fusarium verticillioides, em arabidopsis e ii) Avaliar o potencial das construções gênicas únicas de RNAi (Lae1, Hog1, Snf1, Sid1, Top1 e Fgl1 em arabidopsis para HIGS de F. graminearum. Visando ao silenciamento dos genes correspondentes nos fungos, plantas de arabidopsis foram transformadas com Agrobacterium tumefaciens contendo estas construções gênicas. A seleção e avanço de gerações de plantas transgênicas foram feitos, a segregação dos transgenes foi verificada e correlacionada com o número de inserções, e a resposta a F. graminearum foi verificada via inoculação em folhas destacadas e inflorescências. Em trigo, espigas de linhagens transgênicas nas gerações T2 e T3 contendo as construções gênicas RNAi-Chs3b e RNAi-Cyp51-Tri foram inoculadas com F. graminearum e avaliadas quanto à severidade, quantidade de grãos giberelados, níveis de DON e expressão relativa dos genes alvo no patógeno. Linhagens de arabidopsis contendo as construções gênicas RNAi-Chs3b, -Cyp51-Tri e -Synchit2 não apresentaram diferença quanto à severidade em folhas destacadas e inflorescências, duas linhagens transgênicas contendo a construção RNAi-Cyp51-Tri apresentaramredução nos níveis de deoxinivalenol (DON). As linhagens transgênicas de trigo BRS Guamirim contendo as construções gênicas RNAi-Chs3b e RNAi-Cyp51-Tri não apresentaram reduções significativas quanto a severidade, AACPD, porcentagem de grão giberelados e peso de grãos. Uma linhagem de trigo com RNAi-Cyp51-Tri apresentou redução no nível de DON. Não foi detectada a redução na expressão dos genes Chs3b, Cyp51A, Cyp51B e Tri5 em F. graminearum expostos às linhagens transgênicas de trigo. Em linhagens transgênicas de arabidopsis tendo como alvo para HIGS os genes Lae1, Hog1, Snf1, Sid1 e Top1 de F. graminearum, apresentaram resposta não significativa quanto a severidade da doença em folhas destacadas. Estudos adicionais são necessários no intuito de verificar se os siRNAs estão sendo produzidos nestas plantas ou no fungo, analisar os níveis de expressão dos genes alvo ainda não verificados, além de testar o silenciamento em mais eventos, novas sequências e genes alvo.por
dc.description.abstractGene constructions for host-induced gene silencing in arabidopsis and wheat for Fusarium Head Blight control. [154] f. Thesis (Doctorate in Agronomy) – University of Passo Fundo, Passo Fundo, 2021. Fusarium Head Blight caused by the ascomycetus fungus Gibberella zeae (Schwein.) Petch, asexual form Fusarium graminearum Schwabe stands out as an important wheat disease, for reducing the productivity and quality of grains, in addition to causing contamination by mycotoxins. The available control strategies, such as genetic resistance, chemical and cultural controls, are insufficient to contain epidemics in years when environmental conditions are favorable to infection. Certain factors, it is necessary to seek new strategies for the control of this disease. The Host Induced Gene Silencing (HIGS) technology, which is based on interference RNA (RNAi) and, in the case of plants, aims at silencing important genes for the growth, development or pathogenicity of pathogens. This strategy can be used to control phytopathogenic fungi, and an increase in resistance to F. graminearum in wheat and barley has already been developed. The major objective was to verify the ability of RNAi gene constructs for HIGS of target genes important for pathogenicity or virulence without F. graminearum control, and the specific objectives i) To evaluate the potential of multiple RNAi-Chs3b, RNAi-Cyp51-Tri multiple gene constructs in arabidopsis and wheat and the RNAi-Synchit2 gene construct, with part of the Fusarium verticillioides Chitin synthase gene, in arabidopsis and ii) Evaluate the potential of the unique RNAi gene constructs (RNAi-Lae1, -Hog1, -Snf1, -Sid1, -Top1 and -Fgl1 in arabidopsis for F. graminearum HIGS aiming at silencing the corresponding genes in the fungus. Arabidopsis plants were transformed with Agrobacterium tumefaciens containing these gene constructs, correlated with the number of insertions, and the response to F. graminearum was verified via inoculation in detached leaves and inflorescences. In wheat, spikes of transgenic lines in the T2 and T3 generations containing the RNAi-Chs3b and RNAi-Cyp51-Tri gene constructs were inoculated with F. graminearum and evaluated for severity, Fusarium-damaged kernels, DON levels and relative expression of target genes from the phatogen. Lines of arabidopsis containing the RNAi-Chs3b, -Cyp51-Tri and -Synchit2 gene constructs did not show difference in severity in detached leaves and inflorescences, two transgenic RNAi-Cyp51-Tri lines show reduction in deoxynivalenol (DON) levels. The transgenic BRS Guamirim wheat lines containing the RNAi-Chs3b and RNAi-Cyp51-Tri gene constructions showed no reductions related to severity, AACPD, Fusarium-damaged kernels and grain weight. A wheat line with RNAi-Cyp51-Tri showed a reduction in DON level. No reduction in the expression of the Chs3b, Cyp51A, Cyp51B and Tri5 genes was detected in F. graminearum exposed to transgenic wheat lines. In transgenic lines of arabidopsis targeting the genes Lae1, Hog1, Snf1, Sid1 and Top1 of F. graminearum for HIGS, dissipated response regarding the severity of the disease in detached leaves. Additional studies are added in order to verify whether siRNAs are being found in plants or in the fungus, analyzing the expression levels of target genes not yet verified, in addition to testing silencing in more events, new sequences and target genes.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Jucelei Domingues (jucelei@upf.br) on 2022-06-30T12:15:32Z No. of bitstreams: 1 2021EduardoAndreRoesler.pdf: 2321714 bytes, checksum: f5762413c636669c25c3143b4555236d (MD5)eng
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2022-06-30T12:15:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2021EduardoAndreRoesler.pdf: 2321714 bytes, checksum: f5762413c636669c25c3143b4555236d (MD5) Previous issue date: 2021-04-05eng
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESpor
dc.formatapplication/pdf*
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade de Passo Fundopor
dc.publisher.departmentFaculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMVpor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.initialsUPFpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Agronomiapor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.subjectTrigo - Doenças e pragas - Controlepor
dc.subjectTrigo - Cultivopor
dc.subjectGibberella zeaepor
dc.subjectSilenciamento gênicopor
dc.subject.cnpqCIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIApor
dc.titleConstruções gênicas para o silenciamento gênico induzido pelo hospedeiro em arabidopsis e trigo para o controle de giberelapor
dc.typeTesepor
Appears in Collections:Programa de Pós-Graduação em Agronomia

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
2021EduardoAndreRoesler.pdfTese Eduardo André Roesler2.27 MBAdobe PDFView/Open ???org.dspace.app.webui.jsptag.ItemTag.preview???


Items in TEDE are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.