@PHDTHESIS{ 2021:2062457153,
 	title = {Construções gênicas para o silenciamento gênico induzido pelo hospedeiro em arabidopsis e trigo para o controle de giberela},
 	year = {2021},
 	url = "http://tede.upf.br:8080/jspui/handle/tede/2251",
 	abstract = "Construções gênicas para o silenciamento gênico induzido pelo hospedeiro em arabidopsis e trigo para o controle de giberela. [154] f. Tese (Doutorado em Agronomia) – Universidade de Passo Fundo, Passo Fundo, 2021.
 A giberela causada pelo fungo ascomiceto Gibberella zeae (Schwein.) Petch, forma assexuada Fusarium graminearum Schwabe se destaca como importante doença do trigo, por reduzir a produtividade e qualidade dos grãos, além de causar contaminação por micotoxinas. As estratégias de controle disponíveis, tais como a resistência genética, os controles químicos e culturais são insuficientes para conter epidemias nos anos em que as condições ambientais são favoráveis à infecção. Considerando esses fatores, é necessário buscar novas estratégias para o controle desta doença. A tecnologia de Silenciamento Gênico Induzido pelo Hospedeiro (Host Induced Gene Silencing, HIGS), é baseada em RNA de interferência (RNAi) e, no caso de plantas, visa ao silenciamento de genes importantes para o crescimento, desenvolvimento ou patogenicidade dos patógenos. Esta estratégia pode ser utilizada no controle de fungos fitopatogênicos, e já foi demonstrado o aumento na resistência a F. graminearum em trigo e cevada. O objetivo geral foi verificar a capacidade de construções gênicas de RNAi para HIGS de genes alvo importantes para a patogenicidade ou virulência no controle de F. graminearum, e objetivos específicos: i) Avaliar o potencial das construções gênicas múltiplas RNAi-Chs3b, RNAi-Cyp51-Tri em arabidopsis e trigo e a construção gênica RNAi-Synchit2, com parte de gene quitina sintase de Fusarium verticillioides, em arabidopsis e ii) Avaliar o potencial das construções gênicas únicas de RNAi (Lae1, Hog1, Snf1, Sid1, Top1 e Fgl1 em arabidopsis para HIGS de F. graminearum. Visando ao silenciamento dos genes correspondentes nos fungos, plantas de arabidopsis foram transformadas com Agrobacterium tumefaciens contendo estas construções gênicas. A seleção e avanço de gerações de plantas transgênicas foram feitos, a segregação dos transgenes foi verificada e correlacionada com o número de inserções, e a resposta a F. graminearum foi verificada via inoculação em folhas destacadas e inflorescências. Em trigo, espigas de linhagens transgênicas nas gerações T2 e T3 contendo as construções gênicas RNAi-Chs3b e RNAi-Cyp51-Tri foram inoculadas com F. graminearum e avaliadas quanto à severidade, quantidade de grãos giberelados, níveis de DON e expressão relativa dos genes alvo no patógeno. Linhagens de arabidopsis contendo as construções gênicas RNAi-Chs3b, -Cyp51-Tri e -Synchit2 não apresentaram diferença quanto à severidade em folhas destacadas e inflorescências, duas linhagens transgênicas contendo a construção RNAi-Cyp51-Tri apresentaramredução nos níveis de deoxinivalenol (DON). As linhagens transgênicas de trigo BRS Guamirim contendo as construções gênicas RNAi-Chs3b e RNAi-Cyp51-Tri não apresentaram reduções significativas quanto a severidade, AACPD, porcentagem de grão giberelados e peso de grãos. Uma linhagem de trigo com RNAi-Cyp51-Tri apresentou redução no nível de DON. Não foi detectada a redução na expressão dos genes Chs3b, Cyp51A, Cyp51B e Tri5 em F. graminearum expostos às linhagens transgênicas de trigo. Em linhagens transgênicas de arabidopsis tendo como alvo para HIGS os genes Lae1, Hog1, Snf1, Sid1 e Top1 de F. graminearum, apresentaram resposta não significativa quanto a severidade da doença em folhas destacadas. Estudos adicionais são necessários no intuito de verificar se os siRNAs estão sendo produzidos nestas plantas ou no fungo, analisar os níveis de expressão dos genes alvo ainda não verificados, além de testar o silenciamento em mais eventos, novas sequências e genes alvo.",
 	publisher = {Universidade de Passo Fundo},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Agronomia},
 	note = {Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMV}
}