@MASTERSTHESIS{ 2009:234356158,
 	title = {Embriogênese somática, melhoramento da resposta in vitro e transformação de milho (Zea may L.) via Agrobacterium tumefaciens},
 	year = {2009},
 	url = "http://10.0.217.128:8080/jspui/handle/tede/494",
 	abstract = "A engenharia genética de plantas abre novas perspectivas na obtenção de genótipos superiores de milho (Zea mays L.). A transformação via Agrobacterium tumefaciens, tem sido o método preferido para este fim, para isso a cultura de tecidos é um pré-requisito. No entanto, o milho é considerado uma das culturas mais recalcitrantes para o cultivo in vitro e transformação genética. Os pontos críticos para utilização desta técnica se referem ao uso de genótipos responsivos in vitro, tipos de explantes utilizados para iniciar a cultura embriogênica e protocolos bem ajustados para a transferência de T-DNA via Agrobacterium tumefaciens. Desta forma, este trabalho objetivou testar explantes foliares e segmentos de pendão imaturo para acelerar o processo de obtenção de calos embriogênicos, desenvolver híbridos através do cruzamento sexual de duas linhagens responsivas para melhoria da capacidade de resposta in vitro e avaliar a transferência do T-DNA através da infecção de calos embriogênicos e segmentos de pendão imaturo com Agrobacterium tumefaciens. Os experimentos foram desenvolvidos nos Laboratórios de Biotecnologia Vegetal, Bacteriologia e Virologia da FAMV/UPF. Para avaliação dos explantes foliares foram utilizados quatro genótipos selecionados (L20, HS1, HS2 e V4), os explantes utilizados foram: segmentos de pendão imaturo, de folhas basais de plântulas obtidas in vitro e de folha de plantas com 6-7 semanas, e três diferentes meios de indução de calos baseados no meio N6. Neste experimento concluiu-se que segmentos foliares de milho apresentam baixo potencial de embriogênese somática nos genótipos testados não superando a resposta do pendão imaturo. Para o melhoramento da resposta in vitro, duas linhagens (L2 e L20) com alta frequência produção de calos embriogênicos a partir de pendão imaturo foram usadas em cruzamentos recíprocos produzindo os híbridos H3MT-1 (L2 X L20) e H3MT-2 (L20 XL2). Pendões imaturos das linhagens e seus híbridos foram avaliados in vitro. Os híbridos F1 de milho não diferiram do genitor L20 na produção de calos embriogênicos. No entanto, a utilização de plantas híbridas é vantajosa pois apresentam alto vigor quando comparado à linhagens. Para avaliar a transferência do T-DNA em milho, calos embriogênicos e pendões imaturos de diferentes genótipos foram infectados com Agrobacterium tumefaciens da linhagem EHA 105, portadora do plasmídio pCambia 3301 (este plasmídio carrega o gene repórter gus e o gene marcador bar) utilizando o protocolo modificado de Vega et al. (2008). A transferência do T-DNA foi avaliada por meio de ensaio histoquímico para GUS (JEFFERSON et al., 1987). Os controles dos dois explantes (não infectados com a Agrobacterium tumefaciens) apresentaram background (expressão de um gene semelhante ao gus). Os pendões do genótipo H3MT-1 e os calos embriogênicos  da linhagem L2 apresentaram intensidade de coloração azul superior aos seus respectivos controles sugerindo a transferência de T-DNA",
 	publisher = {},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Agronomia},
 	note = {Ciências Agrárias}
}