@PHDTHESIS{ 2018:1829315235, title = {Desenvolvimento de plantas de milho que expressam Jaburetox visando resistência a lepidópteros-praga}, year = {2018}, url = "http://tede.upf.br:8080/jspui/handle/tede/1846", abstract = "A cultura do milho (Zea mays L.) tem grande importância no cenário mundial, por ser uma fonte rica em carboidratos, proteínas e óleo, servindo de alimento para humanos e animais. Um dos principais fatores que comprometem o rendimento e a qualidade da produção desta cultura é a incidência de pragas. Dentre as pragas destacam-se os lepidópteros como a lagarta-do-cartucho, Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) e a Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae). Nas ultimas décadas, com o advento da biotecnologia foi desenvolvida uma nova tática de controle de pragas, que consiste nas plantas geneticamente modificadas resistentes a insetos, principalmente lepidópteros. Um novo peptídeo derivado de Urease de planta, denominado Jaburetox (JBTX), tem demonstrado toxicidade contra alguns insetos-praga demonstrando ser um bom candidato para produção de plantas de milho resistentes a esses lepidópteros-praga. Porém, para se chegar a plantas com essas características, além da transferência do DNA para a planta, são necessários vários estudos de expressão gênica, toxicidade das plantas aos insetos e a transferência do gene para as próximas gerações de forma estável. Para tanto, esse trabalho teve como objetivo verificar, primeiramente, se o peptídeo JBTX é tóxico para H. armígera, já que é uma praga recentemente introduzida no Brasil e altamente polífaga e após verificar se é possível produzir plantas de milho que expressem estavelmente o gene Jbtx e que sejam resistentes à S. frugiperda. No primeiro trabalho foram utilizadas duas versões do peptídeo JBTX, uma completa e outra deletada, e dois instares da lagarta (primeiro e terceiro). Os resultados sugerem que as duas formas de JBTX testadas são eficientes no controle de H. armigera, porém a forma completa do JBTX resultou em redução significativa do consumo. As lagartas neonatas apresentaram 69% de mortalidade e redução de 70% do consumo e lagartas de terceiro instar apresentaram 70% de mortalidade quando tratadas com esse peptídeo. Para produzir plantas de milho geneticamente modificadas foi utilizado o gene referente à versão completa do JBTX e o método de Agrobacterium tumefacies como vetor para integração do gene no genoma da planta. Foram obtidos diferentes eventos, os quais transferiram o gene de forma estável para as próximas gerações. Na geração T2 foram selecionadas as plantas dos eventos com maior expressão gênica para realizar o bioensaio com S. frugiperda. Foram selecionadas 18 plantas de 4 eventos diferentes, as quais determinaram de 10 a 39% de mortalidade dos insetos, redução significativa de 65% de peso comparada com o controle, redução de 36% de consumo e redução na fertilidade das mariposas. Duas plantas não deixaram descendentes de S frugiperda, ou seja, nenhum ovo foi viável. Estes resultados mostram que o Jbtx expresso em plantas de milho apresenta efeito subletal nessa espécie de lepidóptero. Neste sentido, plantas transgênicas de milho expressando Jbtx poderão representar uma importante ferramenta dentro do MIP, pois com menor biomassa e consumo alimentar, será menor o potencial dano do inseto à produção.", publisher = {Universidade de Passo Fundo}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Agronomia}, note = {Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMV} }