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http://tede.upf.br:8080/jspui/handle/tede/1119
???metadata.dc.type???: | Dissertação |
Title: | Restrição calórica e extrato de Spirulina platensis frente ao íon ferroso no envelhecimento de Saccharomyces cerevisiae deletada ao gene sir2 |
???metadata.dc.creator???: | Benetti, Fábia |
???metadata.dc.contributor.advisor1???: | Bertolin, Telma Elita Outeiro, Tiago Fleming |
???metadata.dc.description.resumo???: | O processo de envelhecimento e acompanhado por mudancas na atividade de celulas, tecidos e orgaos. O acumulo progressivo destas alteracoes tem sido associado ao desequilibrio na homeostase do organismo em relacao a determinados metais, com enfase ao ion ferroso, configurado na evolucao de patologias neurodegenerativas. O uso de terapias antioxidantes pode interferir neste processo, reduzindo o estresse oxidativo e os danos causados pelo acumulo do ion ferroso (Fe2+). A cianobacteria Spirulina platensis destaca-se por apresentar propriedades funcionais, como antioxidante natural, verificada em modelos in vivo e in vitro. A restricao calorica (RC) tem sido identificada com potencial em reduzir ou retardar patologias associadas ao envelhecimento, bem como, estender o tempo de vida em diversos modelos experimentais. Seus beneficios podem estar relacionados com a ativacao da inducao do gene Silent Information Regulator 2 (SIR2). Neste contexto, buscamos avaliar o potencial do extrato de Spirulina platensis e da RC, em celulas de Saccharomyces cerevisiae, submetidas ao ion ferroso (Fe2+). Cepas de S. cerevisiae, controle (WT) e deletadas ao gene sir2 (sir2¿¢) foram cultivadas em meio padrao (YPD 2 % glicose) e sobre restricao calorica (YPD 0,5 % glicose). Estas cepas foram na sequencia expostas ou nao a 1mM de Fe2+ e a 0,8 mg/mL de extrato de Spirulina platensis durante 1h e apos foram submetidas a um meio nao proliferante (agua destilada esteril, temperatura de 37o C por 24 h), situacao esta, que caracterizou o envelhecimento celular. As celulas foram coletadas para as analises de sobrevivencia celular por plaqueamento e peroxidacao lipidica pelo metodo TBARS (Substancias Reativas ao Acido Tiobarbiturico), antes do envelhecimento (tempo 1 h) e apos envelhecimento (tempo 24 h). Os resultados mostram que a sobrevivencia celular foi reduzida nas cepas deletadas ao gene sir2¿¢. Este efeito foi significativamente evidenciado (p<0,05) antes do envelhecimento para os tratamentos Padrao, RC e RC + Fe2+ e apos o envelhecimento, este mesmo efeito foi observado para os tratamentos Padrao, Extrato de Spirulina platensis, RC, Extrato de Spirulina platensis + Fe2+, RC + Fe2+. Os resultados para peroxidacao lipidica demonstram que a delecao de sir2¿¢ aumentou os niveis de malonaldeido (MDA). Este efeito foi significativo (p<0,05) antes e apos o envelhecimento para os diferentes tratamentos, com excecao do tratamento Padrao no tempo de 1 hora. Neste contexto, concluimos que a delecao do gene sir2¿¢ diminui a sobrevivencia celular e aumenta a peroxidacao lipidica, para todos os tratamentos. Ainda podemos concluir, que as terapias antioxidantes (RC e extrato de Spirulina platensis) mostraram efeito protetor relativo a toxicidade induzida pelo ion ferroso (Fe2+) nas cepas estudadas aumentando a sobrevivencia celular e diminuindo a peroxidacao lipidica para todos os tratamentos. |
Abstract: | The aging process is accompanied by changes in the activity of cells, tissues and organs. The progressive accumulation of these changes has been associated with an imbalance in the homeostasis of the organism in relation to certain metals, with emphasis on ferrous ion, configured in the evolution of neurodegenerative diseases. The use of antioxidant therapies may interfere with this process, reducing oxidative stress and damage caused by the accumulation of ferrous ions (Fe²+). The cyanobacterium Spirulina platensis stands out for having functional properties as natural antioxidant, found in models in vivo and in vitro. The caloric restriction (CR) has been identified with potential to reduce or retard diseases associated with aging, as well as extending the life span in different experimental models. Its benefits can be related to the activation of gene induction Silent Information Regulator 2 (SIR2). We seek to evaluate the potential of the extract of Spirulina platensis and RC in Saccharomyces cerevisiae cells, subjected to Fe²+. Strains of S. cerevisiae, control (WT) and deleted the SIR2 gene (sir2Δ) were cultured in standard medium (YPD 2% glucose) and on caloric restriction (YPD 0.5% glucose). These strains were further exposed or not exposed to 1mM Fe²+ and 0.8 mg / ml of extract from Spirulina platensis during and after 1h underwent a non proliferating (sterile distilled water, temperature of 37 º C for 24 h), this situation, which characterized the cellular aging. Cells were collected for analysis of cell survival by plating and lipid peroxidation by the method TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) before aging time (1 h) and after aging (time 24 h). The results show that cell survival was reduced in the absence of sir2Δ. This effect was demonstrated significantly (p <0.05) before aging for treatments pattern, RC and RC + Fe2+ and after aging, this same effect was observed for treatments pattern Extract Spirulina platensis, RC, Extrac Spirulina platensis + Fe²+, Fe²+ + RC. The results for lipid peroxidation demonstrate that deletion of sir2Δ increased levels of malonaldehyde (MDA). This effect was significant (p <0.05) before and after aging for all treatments, except for the standard treatment time of 1 hour. In this context, we conclude that the gene deletion sir2Δ decreases cell survival and increased lipid peroxidation for all treatments. Although we conclude that antioxidant therapies (RC and extract of Spirulina platensis) showed a protective effect on the toxicity induced by ferrous ion (Fe²+) for both WT cells, as for sir2Δ, with significant results (p <0.05 ) increase in cell survival and reduction in lipid peroxidation. |
Keywords: | Radicais livres (Química) Antioxidantes Envelhecimento Ferro - Metabolismo Free radicals (Chemistry) Antioxidants Aging iron - Metabolism |
???metadata.dc.subject.cnpq???: | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::SAUDE COLETIVA |
???metadata.dc.language???: | por |
???metadata.dc.publisher.country???: | |
Publisher: | |
???metadata.dc.publisher.initials???: | |
???metadata.dc.publisher.department???: | Ciências da Saúde e Ciências Biológicas |
???metadata.dc.publisher.program???: | Programa de Pós-Graduação em Envelhecimento Humano |
???metadata.dc.rights???: | Acesso Aberto |
URI: | http://10.0.217.128:8080/jspui/handle/tede/1119 |
Issue Date: | 22-Mar-2013 |
Appears in Collections: | Programa de Pós-Graduação em Envelhecimento Humano |
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