@MASTERSTHESIS{ 2017:1567417084,
 	title = {Estresses de temperatura e concentrações de acetosiringona na transformação genética de milho via Agrobacterium tumefaciens},
 	year = {2017},
 	url = "http://tede.upf.br:8080/jspui/handle/tede/1840",
 	abstract = "Para estabelecer a técnica de transformação genética de plantas via Agrobacterium tumefaciens, um dos pontos críticos é ajustar os fatores que influenciam a transformação, tais como genótipo da planta e condições de infecção e cocultivo dos explantes, aplicando estratégias que possam aumentar as frequências de transferência do T-DNA como aplicação de estresses antes e durante a infecção dos explantes com a agrobactéria e ajuste da concentração de compostos fenólicos nos meios de infecção e cocultivo. Dessa forma, este trabalho objetivou adequar um protocolo de transformação genética de milho via A. tumefaciens para dois genótipos de milho. O primeiro capítulo deste trabalho avalia o efeito da submissaõ dos embriões imaturos do hibrido Hi-II e da variedade brasileira BR 451 a diferentes condições infecção com a A. tumefaciens EHA101:pTF101, a qual carrega os genes bar e uidA sob controle do promotor CaMV35S. No primeiro experimento os embriões foram submetidos a diferentes temperaturas de infecção (43 oC e temperatura ambiente). No segundo experimento foi aplicado um estresse combinado (46 oC por 3 minutos, resfriamento em gelo por 1 minuto, centrifugação a 12.000 rpm a 4 oC por 10 minutos) antes da infecção com A.
 tumefaciens. No segundo capítulo são descritos os experimentos referentes ao efeito de diferentes concentrações de acetosiringona no meio de infecção (experimento 1) e a suplementação das mesmas concentrações no meio de infecção e também no cocultivo (experimento 2). As concentrações utilizadas foram de 0 ¿M (controle), 100 ¿M, 200¿M, 400¿M e 600¿M. A frequência de transformação transiente foi avaliada através do teste histoquímico de GUS, o qual que evidencia a expressão do gene repórter uidA no tecido vegetal transformado. A frequência de transformação estável foi obtida através da expressão do gene marcador bar. Houve efeito positivo da alta temperatura no aumento da intensidade na expressão do gene repórter uidA. O estresse combinado aplicado antes da infecção gerou mortalidade de aproximadamente 50% dos embriões, reduzindo a eficiência de transformação do genótipo Hi-II. A acetosiringona é de extrema importância no cocultivo para a transferência do T-DNA. O genótipo Hi-II foi afetado pela concentração de AS aplicados somente na fase de infecção, enquanto o genótipo BR 451 não sofreu influência. A concentração de AS aplicada na infecção e no cocultivo influenciou a transformação transiente dos dois genótipos e a dose de 400¿M de AS mostrou-se mais eficiente para a transformação de embriões imaturos de milho dos genótipos Hi-II e BR451. A variedade BR 451 mostrou capacidade de ser transformada mesmo que com frequências inferiores ao híbrido Hi-II.",
 	publisher = {Universidade de Passo Fundo},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Agronomia},
 	note = {Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMV}
}