@MASTERSTHESIS{ 2017:882050035,
 	title = {Desenvolvimento e avaliação imunogênica de duas vacinas baseadas no GnRH suíno com potencial uso em imunocastração},
 	year = {2017},
 	url = "http://tede.upf.br/jspui/handle/tede/1652",
 	abstract = "O hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH) tem como principal função atuar na regulação da reprodução de vertebrados. A imunização ativa contra o GnRH tem sido utilizada estrategicamente para neutralizar o GnRH endógeno e promover a imunocastração dos animais vacinados. Este método substitui a castração cirúrgica e aumenta a qualidade de vida dos animais. Neste trabalho, apresentamos o desenvolvimento e a avaliação de duas vacinas experimentais baseadas no GnRH suíno com potencial de neutralização do GnRH endógeno de ratos. Os genes codificantes das proteínas recombinantes Construct007 (carreador 001 + GnRH) e constructCTBsGnRh7-24His (carreador 002 + GnRH) foram sintetizados pela empresa Amplicon Vaccine (Pullman, USA) e clonados no vetor de expressão pET24. Em seguida, as construções foram transformadas quimicamente em Escherichia coli cepa ER2566 e a expressão das proteínas recombinantes foi induzida overnight com IPTG. Após lise celular, procedeu-se a purificação das proteínas mediante cromatrografia líquida de proteína utilizando uma coluna carregada com íons de níquel. Após a diálise das proteínas em PBS (pH 7,2), as vacinas experimentais foram formuladas com 50 ¿g dos antígenos puros potencializados com 15% de adjuvante Montanide Gel 01 (Seppic, França). Um total de 12 ratos Wistar, machos adultos, foram aleatoriamente separados em 3 grupos. Os dois primeiros grupos foram imunizados pela via intramuscular com a vacina Construct007 ou constructCTBsGnRh7-24His. O terceiro grupo foi inoculado com PBS + Montanide Gel 01. O protocolo de vacinação consistiu em 2 doses com intervalo de 21 dias. Clinicamente, avaliou-se a inocuidade das formulações e o desenvolvimento testicular (tamanho e peso dos testículos), e imunologicamente a capacidade das vacinas de induzirem anticorpos anti GnRH suíno. Os animais imunizados com vacina baseada na proteína Construct007 apresentaram títulos de anticorpos significativamente superiores em comparação com aqueles que foram vacinados com proteína recombinante constructCTBsGnRh7-24His. Clinicamente, a resposta de anticorpos induzida pela vacina Construct007 foi capaz de neutralizar o GnRH endógeno de ratos, reduzindo significativamente o desenvolvimento testicular destes animais em comparação com os animais controles (PBS + Montanide Gel 01), bem como, em comparação com aqueles vacinados com a
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 proteína constructCTBsGnRh7-24His. Levando em consideração a inocuidade e a capacidade funcional de bloqueio do GnRH induzida pela formulação Construct007, torna-se evidente o potencial uso desta vacina experimental em um futuro estudo de imunização na espécie alvo. Esta dissertação contém dados potencialmente patenteáveis e que devem ser mantidos em sigilo até sua tramitação junto as agências regulatórias de patentes nacionais e internacionais.",
 	publisher = {Universidade de Passo Fundo},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Bioexperimentação},
 	note = {Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMV}
}