@MASTERSTHESIS{ 2016:997016975,
 	title = {Atrazina reduz a expressão de genes imunológicos em peixes},
 	year = {2016},
 	url = "http://tede.upf.br/jspui/handle/tede/1596",
 	abstract = "O Jundiá (Rhamdia quelen) é um peixe comumente encontrado em rios e lagos da América do Sul e possui diversas características favoráveis ao cultivo intensivo em mono ou policultivo. No sul do Brasil, em muitas áreas vicinais à piscicultura, ocorre um amplo uso de defensivos agrícolas, principalmente herbicidas, que contaminam as águas e prejudicam a produção de peixes. A exposição de peixes ao herbicida atrazina causa uma série de alterações, inclusive no sistema imune. O funcionamento do sistema imunológico depende da interação entre diversos tipos de células e é orquestrado por citocinas, as quais desempenham um papel primordial na resposta imune. Além disso, enzimas produzidas por células fagocíticas, como a mieloperoxidase, são fundamentais para a eliminação de diversos microrganismos. Nesse contexto, a análise da expressão de genes relacionados ao sistema imunológico é importante para estabelecer quais as vias moleculares envolvidas nas alterações observadas no sistema imune de peixes expostos à produtos químicos. Neste estudo, o principal objetivo foi avaliar a expressão de genes imunológicos, por meio da reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa (RT-qPCR), em jundiás expostos a atrazina. Os primers foram selecionados a partir de comparações com espécies de peixes de maior similaridade filogenética com o Rhamdia quelen. Foram selecionados primers para os genes de expressão endógena ¿-actina e RNA18s e para os genes imunológicos Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-¿), Interleucina 1 beta (IL-1¿), IRAK4, Mieloperoxidase e Mx. Para a avaliação da expressão gênica in vivo, os peixes foram distribuídos em três tanques, um grupo controle sem adição de produtos químicos, e dois grupos contendo concentrações de 0,102 mg/L e 1,02 mg/L de atrazina, correspondente à 1% e 10% da CL50-96h, respectivamente. Os peixes foram capturados após 48 h após para remoção do rim, purificação dos leucócitos mononucleares, extração de RNA e avaliação da expressão gênica. Para a avaliação da expressão gênica in vitro, os leucócitos mononucleares isolados do rim de três Jundiás saudáveis foram cultivados e expostos a concentrações de 1 e 10 ¿g/ml de atrazina por 24 horas. Células não expostas a produtos químicos e expostas somente ao solvente foram utilizadas como controles. Na avaliação in vivo, os níveis de mRNA dos genes Mieloperoxidase e IL-1¿ estavam significativamente reduzidos (p < 0.05) nos peixes expostos a 1,02 mg/L de atrazina. A expressão gênica do TNF-¿ estava reduzida nos dois grupos expostos a atrazina. Não houve alteração significativa dos níveis de mRNA dos genes Mx e IRAK4. Na avaliação in vitro, a expressão do gene da mieloperoxidase e IRAK4 encontraram-se significativamente reduzidos no grupo exposto a 10 ¿g/ml de atrazina. A expressão gênica do TNF-¿ estava significativamente reduzida no grupo exposto a 1 ¿g/ml de atrazina. Nos genes IL-1¿ e Mx não houve alteração significativa dos níveis de mRNA. De forma geral, os resultados dos experimentos in vivo e in vitro foram similares. Com este estudo nós demonstramos que a atrazina causa redução da expressão de genes fundamentais para a regulação da resposta imune e que isso possivelmente está relacionado com a redução da capacidade de defesa dos peixes frente ao desafio com patógenos presentes no meio aquático.",
 	publisher = {Universidade de Passo Fundo},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Bioexperimentação},
 	note = {Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMV}
}