@MASTERSTHESIS{ 2016:593761612, title = {RNA interferência como alternativa para o controle de helicoverpa armigera mediante silenciamento gênico}, year = {2016}, url = "http://tede.upf.br/jspui/handle/tede/1450", abstract = "A lagarta Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) é considerada inseto-praga de culturas de importância econômica. Grupos de pesquisas têm estudado o RNA de interferência (RNAi) para silenciamento de genes vitais do inseto alvo. A redução da expressão desses genes pode causar mortalidade e afetar o desenvolvimento do inseto alvo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a habilidade do RNAdf com complementariedade à porção do gene rieske de H. armigera em induzir a resposta de RNAi e causar mortalidade, quando disponibilizado oralmente. O gene rieske codifica para uma proteína mitocondrial envolvida no transporte de elétrons e produção de energia. A hipótese testada foi a de que o RNAdf entra nas células epiteliais do intestino induzindo a resposta de RNAi, reduzindo a expressão do gene rieske e consequentemente, a produção de energia. Este efeito reduziria a habilidade das células em realizar as funções digestivas resultando na mortalidade das larvas. Os experimentos foram realizados nos Laboratórios de Biotecnologia Vegetal e de Entomologia da Universidade de Passo Fundo. Inicialmente, foi determinado o perfil de expressão do gene rieske durante o desenvolvimento larval no tecido digestório e do restante do corpo e foram identificados os genes de referência apropriados para uso em RT-qPCR. Em seguida, foi determinada a dose de RNAdf mais efetiva na indução da mortalidade das larvas. Posteriormente, foi avaliada a ocorrência do silenciamento gênico e a sua relação com a mortalidade e o desenvolvimento das larvas. Os genes de referência mais estáveis para normalização da expressão do gene rieske por RT-qPCR foram fator de elongação 1-¿ (ef1-¿) e gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (GAPDH). A dose de 0,3 ¿g.cm-2 de RNAdf rieske foi mais efetiva na indução da mortalidade, redução do ganho de peso e consumo. A disponibilização, a cada dois dias, de discos foliares de soja contendo 0,3 ¿g.cm-2 de RNAdf rieske causou a redução dos transcritos do gene rieske e mortalidade das larvas de H. armigera. Porém, quando a alimentação com discos foliares tratados com RNAdf foi intercalada com discos foliares não tratados os efeitos observados não foram similares. Esses resultados indicam que o silenciamento do gene rieske mediado por RNAi tem potencial para ser utilizado para controle de H. armigera, porém, para maior efetividade, a disponibilização do RNAdf deve ser contínua.", publisher = {Universidade de Passo Fundo}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Agronomia}, note = {Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária – FAMV} }